Questa tela per lungo tempo considerata dispersa, è stata di recente ritrovata fra il materiale accumulato presso la chiesa e prontamente si è provveduto al suo restauro.

L'opera databile nel XVII secolo era stata attribuita al pittore di Fossombrone Giovanni Francesco Guerrieri, ma certamente non si può riconoscere come originale dell'artista, per quanto emergano elementi stilistici vicini al suo fare.

La sua originaria collocazione era presso il secondo altare a sinistra, dedicato alla Madonna.

L'opera ha un impianto compositivo piramidale con al vertice la Madonna assisa in trono con il Bambino in grembo ed affiancata da due angeli sospesi in volo, che tengono in mano un ramoscello e una corona, mentre ai piedi del trono sono poste le due sante. A sinistra Santa Giustina, patrona dell'ordine monastico delle Benedettine, nel gesto di indicare una ferita al petto, a destra Sant'Orsola riconoscibile per i suoi attributi: il vessillo crociato e la corona in capo. Entrambe le Sante recano in basso la scritta indicante i loro nomi.